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ÉLEVAGE DE DROSOPHILES
La drosophile ( drosophila melanogaster ) est un insecte diptère plus communément connu sous le nom de mouche du vinaigre et que l'on rencontre sur les fruits très mûrs . Cette petite mouche , de 3 à 4 mm de longueur s'élève très facilement au laboratoire .
C'est un matériel de choix pour les expériences de génétique ; en effet , son élevage étant simple et son cycle de vie très court on obtient de nombreuses générations en un temps relativement court .De plus , on reconnait aisément du moins sur la souche dite "sauvage" les mâles des femelles .
Chez la drosophile , la plupart des mutations portent sur des caractères très distincts du type "sauvage" , donc leur transmission est facile à suivre au fil des générations .
Les principales mutations portent sur la couleur du corps , des yeux , et la taille des ailes .
Contrairement à la souche sauvage , les souches mutantes , pour la plupart , vivent difficilement dans la nature et devront être conservées en élevage au laboratoire .
Cycle de la drosophile (schématisation)
Elevage de drosophiles au laboratoire
La drosophile s'élève facilement en laboratoire sur un milieu artificiel.
Composition et quantités pour un litre de milieu de culture
# semoule de maïs
80 à 100 g
# levure de bière
(ou extrait autolythique)
80 g pour la levure fraîche
20 g pour l'extrait
# agar-agar
16 g
# nipagine ( solution à 10 % d'hydroxy-benzoate de méthyle dans de l'éthanol à 95 % )
40 ml
# eau distillée
compléter à 1000 ml
Préparation du milieu de culture
Dans un bécher ou même dans une casserole , délayer la semoule de maïs avec un peu d'eau froide , ajouter en agitant la levure ( ou extrait de levure ) , l'agar-agar , et la nipagine, compléter à 1 litre avec de l'eau distillée et porter à ébullition pendant 1 à 2 minutes ( attention , agiter sans arrêt pour ne pas brûler le fond du récipient ). Le milieu étant prêt , le répartir dans des flacons en verre de 250 ou de 500 ml , les porter à 120°C pendant 20 minutes ( autoclave ou autocuiseur ).Répartir ensuite ce milieu ( encore chaud , le milieu se solidifie très rapidement ) dans les récipients prévus pour l'élevage ( la hauteur de milieu devra être d'environ 2 à 3 cm , plus si les récipients sont étroits ).Ces récipients peuvent être des erlenmeyers de 200 ml , des tubes à essais de large diamètre ( ceux qui servent à la culture in vitro ) ou tout autre récipient en votre possession .Fermer ces tubes avec du coton cardé et attendre le refroidissement total avant d'introduire les drosophiles. Si les récipients utilisés sont de grande contenance ( 200 ml ou plus ) prévoir des bandelettes de papier filtre que l'on disposera à l'intérieur , les larves viendront se fixer dessus pour le passage à la pupe .
pour ma par j'utilise de souche de drosophiles a ailes atrophié donc les formes vestigiale
cela est bien plus pratique pour nourrir autres larves , insectes batracien terrestre et arboricole car même si les droso ne vole plus elles grimpe quand même, donc je vais vous donner ma recette qui est tous aussi facile a faire tous aussi efficace et surtout plus simple :
compote de fruit discount 4 mesure
flocon d'avoine 1 mesure + 1 mesure de céréale de lait pour biberon bébé.
levure diététique 1 cuillerée a soupe
vinaigre de cidre 2 cuillerée a soupe
tous mélanger dans un saladier et laisser reposé a température ambiente pendant 24h
puis posé une couche de 3cm au fond du récipient et posé le substrat ajouter une colonies de 25 a 50 drosophile et tapoter énergiquement sur les boite afin de stimuler la repro placer les boite a la lumière et a une température de 19 a 25 degré selon le besoin d'avoir des drosophiles plus ou moins rapidement pour le support de ponte je prend cette fameuse fausse paille que lon trouve dans les cagette a fruit en fin de marcher sa grouille de partout y'a plus cas
Mise en élevage d'une souche sauvage de drosophiles
A partir d'une souche achetée chez des fournisseurs spécialisés ou ( pour l'académie de Toulouse au réseau académie-université ) sélectionner des individus mâles et femelles . Pour cela , il faut les anesthésier , afin de pouvoir les observer à la loupe binoculaire. Pour l'anesthésie , on utilise un fil électrique très fin ( fil de téléphone par exemple ) au bout duquel on place une petite boule de coton , tremper le coton dans de l'éther diéthylique , l'égoutter puis l'introduire dans le récipient contenant les drosophiles , attendre 1 à 2 minutes , quand les individus ne bougent plus dans le récipient , vider son contenu dans une boite de Pétri et les observer sans tarder sous une loupe binoculaire , à l'aide d'un petit pinceau , trier les mâles des femelles( pour démarrer un élevage juste quelques individus suffisent , on peut mettre par exemple 5 à 6 mâles et une dizaine de femelles ). Toujours à l'aide du pinceau , introduire les mouches dans le récipient contenant le milieu de culture , incliner celui-ci afin d'éviter que les insectes ne se "collent" sur le milieu de culture , attendre leur réveil pour remettre le récipient en position verticale.Au bout de quelques jours , les femelles pondent leurs oeufs dans le milieu de culture et 2 à 3 jours après la ponte naissent de jeunes larves ( asticots ) qui vont se nourrir du milieu et croître rapidement; en effet au bout de quatre jours les larves devenues plus grosses s'immobilisent pour donner une pupe et quatre jours après l'apparition des pupes naissent de jeunes mouches semblables à leurs parents.
Réalisation d'un croisement entre deux souches
Procéder comme pour un élevage classique mais cette fois il y a quelques contraintes . Choisir les mâles d'une souche et les femelles d'une autre souche en les triant sous la loupe binoculaire ( pour les mâles il n'y a pas de problèmes , mais pour les femelles elles doivent être vierges si l'on veut réaliser un bon croisement et donc , il faut les trier entre 6 à 8 heures après leur éclosion ). Les anesthésier comme précédemment et introduire dans le récipient prévu pour l'élevage 5 à 6 mâles d'une souche X et une dizaine de femelles d'une souche Y ( bien sûr il ne faut pas introduire de mâles Y ou de femelles X , donc il faut faire très attention en les triant) . Faire également un croisement entre des mâles Y et des femelles X dans un autre récipient , indiquer sur chacun d'eux la date du croisement et le type de croisement réalisé , au bout de quelques jours quand on aperçoit des larves , ouvrir le récipient et lacher les parents dans la nature pour ne pas avoir d'erreurs au comptage futur ( si aucune larve n'est visible , recommencer un croisement ). Les drosophiles ainsi obtenues seront un souche hybride ou F1 .
Pour obtenir une F2 , il faut proceder de la même manière en croisant un mâle F1 et une femelle F1
. On peut également pratiquer un croisement test ( c'est un croisement entre un individu de la F1 et le parent récessif ).
Quelques souches de drosophiles ( les plus communes )
vestigiale
ébony-sépia
sépia-vestigiale :
white
amicalement
amicalement .
